Получение ИФА-конъюгатов на основе МКАТ.

Самостоятельное приготовление конъюгата антител с фер¬ментом задача, вполне посильная для любого квалифици¬рованного специалиста. Основное условие ее успешного решения наличие хорошей гипериммунной антисыворотки, главные критерии качества которой специфичность и необходимый титр. Остальные этапы довольно просты. Самостоятельно приготовленные конъюгаты, как правило, дешевле коммерческих. Кроме того, некоторые конъюгаты нужной специфичности не выпускаются в виде коммерческих реагентов. При пересылке коммерческих конъюгатов практически всегда существует риск снижения или даже потери их актив¬ности из-за неоптимальных условий при транспортировке или в местах хранения, особенно при доставке в отдаленные от производителя страны.

Оглавление
3.Получение ИФА-конъюгатов на основе МКАТ 2
3.1. Основные принципы 2
3.2.Конъюгация пероксидазы хрена (ПХ) с IgG 4
3.3.Конъюгация щелочной фосфатазы с IgG одноэтапным методом с использованием глутарового альдегида 6
3.4. Контроль качества конъюгатов 6
Оборудование и принадлежности 9
Буферы и растворы 9
Технологическая схема получения МКАТ 16
Получение иммуногена 16
Первичный скрининг гибридом в ИФА 16
Клонирование гибридных клеток 17
Получение асцитической мжидкости 17
Список литературы 18

1. Goding J. Monoсlonal antibodies. Principles and practice. Acedemic press, San Diego, 1996.
2. Ніколаєнко І.В. Отримання та порівняльний аналіз гібридом-продуцентів моноклональних антитіл, що диференціюють вакцинні та вірулентні поліовіруси І, ІІ та ІІІ типів: Дисертація ..... канд. мед. наук. - Київ, 1999. - 148 с.
3. Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. Пер. с англ. - М.: Мир, 2002. - 589 с.
4. Галкин А.Ю., Николаенко И.В. Гибридомная технология: принцип и применение // Біотехнологія. Освіта. Наука: Тези доповідей учасників I Всеукраїнської науково-практичної конференції студентів, аспірантів та молодих вчених (10-11 лютого 2003 р., м. Київ) / Укл.: І.В.Повстянко, О.Ю.Галкін. К.: Видавництво Політехніка, 2003. С.74 75.
5. Методичні вказівки до виконання організаційно-економічної частини дипломних робіт для студентів хіміко-технологічних спеціальностей всіх форм навчання / Укл.: В.В. Янковий, М.П. Дорошенко, І.О. Попов. К.: НТУУ "КПІ", 1999. 40 с.
6. Смирнов В.В., Сельникова О.П., Думанський В.Д., Мойсеєва Г.В., Гриневич О.Й. Імунобіологічні препарати. Довідник. К.: Моріон, 2001. 192 с.
7. Фармацевтичний ринок України 2002 / Медичний ринок. 2003. - №1. С. 17 - 18.
9. Биотехнология. В 8 кн. / Под ред. Н.С.Егорова, В.Д.Самуилова Кн. 3. Клеточная инженерия. / Р.Г.Бутенко, М.В.Гусев, А.Ф.Киркин и др. М.: Высш. ш., 1987. 127 с.
10. Bains W/ Biotechnology from A to Z.IRL Press, Oxford, England, 1998.
11. Goding J. Antibody production by hybridomas. J. of immunol. Methods, 1980, - V.39. P. 285-308.
12. Иммунологические методы / Под ред. Х.Фримеля. М.: Мир, 1979. 520 с.
13. Антитела. Методы: Кн.1: Пер. с англ. / Под ред. Д. Кэтти.- М. :Мир, 1991. 287с.
14. Моноклональные антитела. Гибридомы: новый уровень биологического анализа: Пер. с англ. / Под рд. Р.Г.Кеннета. М. :Медицина, 1987. 416с.
15. Антитела. Методы: Кн.2: Пер. с англ. / Под ред. Д. Кэтти.- М. :Мир, 1991. 320с.
16. Методы иммунохимического анализа в биологии развития (практическое руководство) / А.Т.Михайлов, В.Н.Симирский. М.: Наука, 1991. 288с.