БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

Биологический факультет кафедра генетики и биотехнологии

ИССЛЕДОВАНИЕ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ

Курсовая работа

студентки 3 курса ШУТ М.В.

Научный руководитель:

канд. биол. наук,

доцент ГЛУШЕН С. В.

Минск 2001г.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ………………………………………………………………..3

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ……………………………………………………4

1.Общие принципы проточной цитометрии ……………………..4

2. Анализ ДНК-гистограмм ……………………………………….5

3. Анализ параметров клеточного цикла………………………….9

4.Наиболее употребительные методики, используемые в цитометрии клеточного цикла………………………………..14

5.Применение цитометрии в молекулярной клинической диагностике………………………………………..17

ЗАКЛЮЧЕНИЕ…………………………………………………………..22

ЛИТЕРАТУРА…………………………………………………..23

ВВЕДЕНИЕ

Возможности применения методов количественной цитометрии в биологических и медицинских исследованиях очень широки. Они включают множество задач, начиная от поиска наиболее информативных морфометрических и цитоспектрофотометрических критериев кинетики
ДНК в клеточном цикле и кончая многопараметрическим изучением гетерогенных популяций исследуемых объектов. Хотя эти задачи могут решаться на различных экспериментальных моделях или клиническом материале, общие принципы остаются одинаковыми как для тех, так и других объектов.

В настоящее время цитометрию принято подразделять на проточную и статическую. Первый вариант цитометрии осуществляется с помощью специальных приборов – проточных цитометров и сортеров. Для статической цитометрии могут быть использованы конфокальные микроскопы, а также более простые и дешевые системы анализа изображений, смонтированные на обычных люминесцентных микроскопах.
Существует много методик, которые с одинаковым успехом можно воспроизводить как с помощью проточной, так и статической цитометрии. Более того, статическая цитометрия в некоторых случаях позволяет получить более обширную информацию о клетках, причем ее производительность не намного меньше проточной.

Настоящий обзор литературы посвящен применению цитометрии для оценки параметров клеточного цикла на экспериментальном и клиническом материале. Хотя в обзоре в основном приводятся сведения, касающиеся проточной цитометрии, с учетом изложенного выше они в значительной степени распространяются также и на статическую цитометрию.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.Общие принципы проточной цитометрии
Метод проточной цитометрии сформировался за последние 30 лет на основе отдельных опытов по подсчету числа частиц и определению их размеров. В 1965 г. появилось первое сообщение о клеточном сортере, а в 70-х годах стали выпускать приборы, способные измерять интенсивность флуоресценции при двух и более длинах волн и определять сразу несколько клеточных параметров.