Подготовка рабочего стола.

Техник осеменатор готовит рабочее место в следующей последовательности:

1. Снимает верхнюю одежду, надевает проглаженный халат утюгом, косынку (колпак) и

сапоги .
2. Проверяет состояние дезоковрика , при необходимости заливает его раствором 2-%-ного едкого натрия .
3. Моет руки с мылом .
4. Осматривает коров , карточки на которых помещены в карманчики календаря на дан- ный период.
5. Предупреждает доярок и скотников , какие коровы должны быть в охоте сегодня и завтра , а при наличии коров в охоте ведет их на пункт искусственного осеменения.
6. Включает плитку , ставит на нее колбу на 800 мл. с дистиллированной водой , вклю - чает утюг.
7. В толстостенную чашку наливают до половины теплой воды , берет кусок серой ва- ты и моет лабораторный и манежный столы , затем насухо вытирает их вначале лабо – раторный , затем манежный.
8. Затем использованную вату помещают в мусорное ведро и моет руки.
9. Готовит путем проглаживания полотенце и по две марлевые салфетки на одну коро- ву , кладет салфетки в тампонницу. Берет тампонницу снимает крышку , кладет в нее тампоны , гладкой поверхностью вверх и пропитывает 96 спиртом с помощью пинцета переносит в тампонницу и закрывает крышкой.

Приготовление рабочих растворов .

Техник осеменатор должен :
1. Приготовить 2 – 3%-ный раствор бикарбоната натрия по 0,5 литра на одну корову ,

500 мл. 1%-ного раствора бикарбоната натрия, или 0,9%-ного раствора хлористого натрия, или 2,9%-ного раствора лимонно - кислого натрия (для этого в 100 мл. дистиллированной воды растворить 1 гр. двууглекислой (пищевой) соды, лимонно - кислого натрия 2,9 ); остудить, разлить растворы в банки под номером 1, 3, 4 (предварительно простирилизо - ванные и пронумерованные ) с притёртыми пробками.
2. Приготовить 70 раствор спирта путём добавления к 73 мл. 96 спирта 27 мл. прокипичёной дистиллированной воды ; правильность приготовления раствора спирта проверить спирто – метром и налить раствор в баночку под №2.
3. Поставить на лабораторный стол баночки под №1, 2, 3, 4, тампонницу со стерильными мар – левыми салфетками и тампонницу с полувлажными спиртовыми тампонами ; для отработан- ных растворов поставить шашку из толстого стекла .
4. Взять подставку для инструментов, обработать её спиртовым тампоном, затем протереть этим же тампоном стол и установить подставку ; использованный тампон поместить в толстостенную чашку.
5. Вторым тампоном обработать наружную поверхность шприца катетера (тампон должен выходить на половину за канюлю шприца , затем двумя пальцами, вращательными движе- ниями, обработать канюлю и продвинуть тампон до середины, затем свернув тампон в двое обработать наружную поверхность до конца.
6. Третьим тампоном обработать пинцеты, стеклянную палочку, термометр и положить на подставку.

Хранение замороженной спермы .

Во время хранения обменные процессы в сперме при кислотном анабиозе, а также при температуре 0 - -5 с хотя и значительно снижены, но все же протекают на довольно заметном уровне. Спермии стареют , расходуют питательные вещества , отравляются продуктами обме- на , разрушаются и гибнут . В результате оплодотворяющая способность их при хранении спер- мы ограничена несколькими сутками . Более глубокий анабиоз с почти полным прекращением обменных процессов достигается замораживанием спермы при низких температурах (-79-196).

В настоящее время способ медленного замораживания спермы быков уступил более произ- водительному быстрому замораживанию, при котором глубокое охлаждение спермы до тем- пературы жидкого азота ( -196 С) достигается в течении нескольких минут. В результате удается лучше сохранить структуру спермиев, получить относительно высокую активность спермы после оттаивания.

Время осеменения самок.

Эффективность искусственного осеменения самок животных в значительной мере зависит от

своевременного введения спермы. Причиной низкой оплодотворяемости часто бывает неуме-

ние выбрать время, наилучшее для осеменения.

Яйцеклетки при выходе из яичников сохраняют способность к оплодотворению всего лишь несколько часов. Поэтому для самок всех видов будет верным общее положение; проводить ис- кусственное осеменение перед овуляцией как можно ближе к её началу.

У коров в отличии от самок других видов овуляция фолликулов происходит через 6 – 15 ча- сов после угасания признаков половой охоты, поэтому их необходимо осеменять в конце поло- вой охоты, которая длится 12 – 18 часов (зимой короче).

При проведении искусственного осеменения учитывают все их физиологические особеннос- ти, но они имеют видовые отклонения, которые следует знать при освоении разных способов осеменения маточного поголовья.

Техника оттаивания
Размораживание спермы производится следующим образом:
1. Поставить на стол перед источником света микроскоп, протереть зеркало.
(Увеличение должно быть в 200 раз).
2. Навести освещение (освещение должно быть равномерное по всему полю зрения.
3. Навести освещение, подключить электрический столик или заправить столик «Морозова» водой с температурой 40 – 42 С и установить его на предметный столик так, чтобы поле зрения было равномерно освещено.
4. Взять предметное и покровное стекла, протереть стерильной марлевой салфеткой и по- ложить на столик «Морозова».
5. Приготовить водяную баню с температурой 40 – 42 С (для определения температуры воды обязательно воспользоваться термометром; затем отмерить цитрат , вылить его в сте- рильный флакончик , закрыть резиновой пробкой и поместить в паровую баню.

6. Надеть защитные очки и перчатки.
7. Снять крышку с сосуда Дьюара и положить ее на табурет , вынуть пробку и положить ее на крышку , обработанным пинцетом достать мешочек со спермой (не выше горловины сосуда), извлечь пинцетом гранулу из мешочка и положить ее во флакон с подогретым концентратом , мешочек опустить в азот , закрыть сосуд Дьюара, снять очки и перчатки , взять флакончик с гранулой , вращательными движениями перемешать содержимое флакона
(оттаивать гранулу в течении 5 – 8 сек.
8. Взять подогретое предметное стекло, нанести стеклянной палочкой каплю спермы , сверху положить покровное стекло и определить активность спермиев.
9. При помощи макро-винта опустить тубус до прикосновения объектива с покровным стек- лом.
10. Посмотреть в окуляр, медленно подняв тубус вращением макро- винта до появлениев спе- рмиев в поле зрения, а при помощи микро-винта навести резкость. Сперма к использованию допускается с оценкой не ниже 3 баллов (т.е. не менее 30% спермиев должны иметь прямо- линейное поступательное движение.

При наличии спермиев только с колебательными движениями сперму оценивают буквой К.

При наличии только манежного движения – буквой М.

Неподвижность всех спермиев обозначают – буквой Н (некроспермия).

В свежеполученной хорошей сперме быка 80 – 90 % спермиев двигается поступательно.

Одновременно с оценкой под микроскопом подвижности спермиев глазомерно определяют густоту спермы – степень насыщенности ее спермиями.

При этом сперма может быть: