Предыдущая страница реферата | 1  2  3  4  5  6  7 | Следующая страница реферата

Цель: Путем качественных реакций определить наличие пептидных связей и
NH2 – групп в молекулах белков; выявить аминокислотный состав белков.

1. Обнаружение в молекулах белков пептидных связей (биуретовая реакция).

К 1-2 мл разбавленного белка добавляют двойной объем 30%-ного раствора
NaOH хорошо перемешивают и приливают 2-3 капли 1%-ного раствора CuSO4.
Снова тщательно перемешивают. Развивается красно-фиолетовое окрашивание.
(Химизм реакции см. на стр.…).

2. Нингидриновая реакция.

К 2-3 мл разбавленного раствора белка приливают 3-4 капли 1%-ного раствора нингидрина в 95%-ном растворе ацетона. Раствор перемешивают и ставят в водяную баню при t=70 0С на несколько минут. Развивается сине- фиолетовое или розово-фиолетовое окрашивание.

Нингидриновая реакция доказывает наличие NH2 – групп в белках (химизм реакции на стр.…).

3. Ксантопротеиновая реакция (реакция на ароматические аминокислоты: фенилаланин, тирозин, триктофан).

В одну пробирку добавляют 5 капель раствора яичного белка, во вторую – раствора желатина, в третью – раствора миозина. Во все пробирки приливают по 3-5 капель концентрированной HNO3 и нагревают. В первой и третьей пробирках образовался белый осадок, который при нагревании окрашивается в желтый цвет и постепенно растворяется в (происходит гидролиз белка), сообщая желтую окраску раствору. Желатина, не содержащая ароматических аминокислот, не дает ксантопротеиновой пробы. Образование желтых пятен на коже при попадании концентрированной HNO3 обусловлено этой реакцией (химизм реакции на стр.…).

4. Реакция на тирозин (реакция Миллона).

Реакция обусловлена наличием в белках аминокислоты тирозина. При нагревании или продолжительном стоянии раствора белка с реактивом Миллона
(раствор нитратов ртути (I) и (II) в HNO3 с примесью HNO2) образуется осадок, окрашенный сначала в розовый, а затем в кроваво-красный цвет.

В 4 пробирки наливают по 5 капель: в первую – раствора яичного белка, во вторую – раствора желатина; в третью – раствора миозина; в четвертую – раствора тирозина. Во все 4 пробирки добавляют по 2-3 капли реактива
Миллона и осторожно нагревают. Наблюдают происходящие изменения (химизм реакции на стр.…).

5. Реакция на цистеин (реакция Фоме).

В первую пробирку приливают 5 капель 1%-ного раствора яичного белка, во вторую – 1%-ного раствора желатины, в третью – раствора миозина. В каждую пробирку добавляют по 5 капель 30%-ного раствора NaOH и по 1 капли
5%-ного раствора ацетата свинца. При интенсивном кипячении жидкость в пробирках с яичным белком и миозином темнеет, так как образуется черный осадок сульфида свинца. В пробирке с раствором желатина черного осадка не образуется, так как данное вещество не содержит серосодержащих аминокислот
(химизм реакции на стр.…).

6. Реакция на аргинин (реакция Сакагути).

В первую пробирку приливают 5 капель раствора яичного белка, во вторую
– раствора желатина, в третью раствора миозина. Во все пробирки добавляют несколько кристаллов резорцина, 1 мл 3%-ного раствора H2O2 и осторожно по стенке приливают 1 мл концентрированной серной кислоты. Через некоторое время на границе раздела (белок – кислота) развивается оранжевое окрашивание (химизм реакции см. на стр.…).

7. Реакция на триптофан (реакция Шульце-Распайля).

В пробирку с раствором белка приливают 2 капли раствора сахарозы и 1 мл концентрированной серной кислоты, следя, чтобы жидкости не смешивались.
На границе раздела жидкостей появляется вишнево-красное окрашивание.

Суть: под влиянием серной кислоты происходит гидролиз сахарозы до моносахаридов, которые обезвоживаются, превращаясь в оксиметилфурфурол.

8. Реакция на гиспеидин и тирозин (реакция Паули).

В пробирку с раствором белка приливают 1 мл 1%-ного раствора сульфаниловой кислоты, 2 мл NaNO2, переливают и добавляют 2-4 мл 10%-ного раствора Na2CO3.

После смешивания раствор окрашивается в вишнёво-красный цвет (химизм реакции см. на стр.…).

Приложение № …

Конспект урока – лекции.

Тема: „Химический состав организмов. Общее знакомство с белками“.

Цель: изучить химический состав организмов. Определить значение белков в осуществлении процессов жизнедеятельности, выявить особенности функционирования белковых тел как носителей жизни.

Рекомендуем скачать другие рефераты по теме: реферат на тему види, конспект урока 6 класс.





Предыдущая страница реферата | 1  2  3  4  5  6  7 | Следующая страница реферата